国内精品久久久久久久coent-国产女主播精品大秀系列-亚洲欧美日韩中文无线码-人妻视频一区二区三区免费-国产精品高清一区二区不卡片

咨詢熱線

15000266580

當前位置:首頁  >  技術文章  >  病毒載體構建穩(wěn)定細胞株有什么優(yōu)勢?

病毒載體構建穩(wěn)定細胞株有什么優(yōu)勢?

更新時間:2018-10-27      點擊次數:2408
  病毒載體構建穩(wěn)定細胞株有什么優(yōu)勢?
  化學試劑介導的轉染方法和電轉,整合率低,同時整合位點不穩(wěn)定,易發(fā)生再次丟失的情況,而且整合位點一般都在轉錄活躍區(qū)之外,所以并不是理想的穩(wěn)定整合工具。另外,整合后的拷貝數是由核內的外源DNA局部濃度,而不是轉染時的DNA的量決定,而化學方法在輸入質粒載體入核的效率比電轉和病毒載體相比要低得多,導致其轉染相同細胞所用質粒載體用量要大大高于其它方法,造成入核質粒載體量難以控制,這也解釋了為什么化學轉染方法和其它兩種方比,更傾向于得到串聯多拷貝。以上種種因素,導致使用非病毒載體轉染方法構建穩(wěn)定株,成功率低,穩(wěn)定性差,穩(wěn)定克隆株易出現不均一(含有非整合細胞)等缺點。
  逆轉錄病毒載體由于整合率高,是非常理想的穩(wěn)定株構建工具。而且通過控制逆轉錄病毒載體轉導的實驗條件,理論上可以確保每個細胞只有單拷貝插入。同時由于病毒載體是通過病毒重組酶將外源片段整合入染色體中,其整合特性和病毒自身整合特性非常相似:偏向于轉錄活躍區(qū)段,且整合后非常穩(wěn)定,在傳代100次后仍然保留在宿主基因組中。重要的是整合幾率和所有其它化學,物理轉染方法比,增加5至6個數量,使得穩(wěn)定株構建不再成為實驗研究的障礙。由于整合幾率非常高,所以很容易獲得混合穩(wěn)定株。
  腺病毒載體整合率和普通轉染方法差異不大,被認為是不能整合的一類病毒載體,因此相關研究數據較少,不建議用來構建穩(wěn)定株。非野生型腺相關病毒載體(Rep-)整合率較低,但因為野生型病毒載體可以定點將病毒基因組整合于人19號染色體,所以從安全性和穩(wěn)定性角度來說,潛力都非常巨大。由于諸多因素,研究人員仍然在對其進行改造中,包括考慮到嚙齒類動物不含有人19號染色體對應的整合位點序列。
聯系方式

郵箱:xiangfbio@163.com

地址:上海市虹口區(qū)四平路710號7層

咨詢熱線

400-821-8510

(周一至周日9:00- 19:00)

在線咨詢
  • 掃一掃 微信咨詢

Copyright©2025 上海復祥生物科技有限公司 All Right Reserved    備案號:滬ICP備10013034號-2     sitemap.xml
技術支持:化工儀器網    管理登陸
主站蜘蛛池模板: 亚洲精品第一国产综合野草社区| 亚洲国产欧美不卡在线观看| 综合久久给合久久狠狠狠97色| 激情欧美成人小说在线视频| 国产精品无码av片在线观看播放| 狼人大香伊蕉在人线国产| 国产无遮挡又黄又爽网站| 天天天天做夜夜夜做| 国产成+人+综合+亚洲欧美丁香花 亚洲日韩av无码一区二区三区 | 精品视频一区二区三区在线观看| 国产精品特黄aaaa片在线观看 | 乌克兰粉嫩xxx极品hd| 亚洲线精品一区二区三八戒| 无码激情亚洲一区| 久久av免费这里有精品| 国产亚洲精品久久久美女| 天堂岛国av无码免费无禁网站 | 在线播放真实国产乱子伦| 老熟妇乱子交视频一区| 日本不卡一区二区三区在线| 国产精品 人妻互换| 国语自产免费精品视频在| 久久综合久久美利坚合众国| 无码国产69精品久久久久孕妇| 色欲欲www成人网站| 欧美最猛性xxxxx免费| av国産精品毛片一区二区网站 | 亚洲国产精品无码av| 久久草| 欧美性色19p| 中国女人内谢69xxxx| 精品人妻伦一二三区久久| 国产做a爰片久久毛片a片美国| 亚洲成a人v欧美综合天堂麻豆| 亚洲国产成人久久综合区| 26uuu另类亚洲欧美日本| 99久久久无码国产精品试看| 亚洲日韩小电影在线观看| 日本xxx在线观看免费播放| 美女自卫慰黄网站| 亚洲高清国产拍精品熟女|